李氏杆菌病是由单核细胞增多性李氏杆菌所引起的人、畜共患散发性传染病,广泛分布于全世界。近年来,新疆多个农牧垦区在每年4~5月或10~11月间饲喂青贮饲料较多的绵羊中发现有头顶墙或转圈,头颈表现一侧性麻痹等神经症状的病羊。为此,我们在病理学、细菌学、流行病学等方面进行了观察研究,确诊为绵羊单核细胞增多症性李氏杆菌病,该病在国内已有公开报道,但对病理组织学观察报道甚少,为了对该病在诊断及预防中提供更全面的理论依据,现将结果报道如下。?
1材料与方法
1.1 流行病学调查?
1.1.1 调查对象 以新疆部分农牧团场羊群为对象,了解饲养管理、饲养方式、发病情况等,并以临床呈现神
经症状为特征的病羊作为病理学观察及研究对象。
1.2 病理学观察 对患有神经症状的病羊进行临床观察,并收集资料,将自然死亡及扑杀病例进行剖检,同时采取病羊脑、心、脾、肾、淋巴结等组织器官经10%甲醛固定,石蜡包埋、切片、H.E.染色、镜检。?
1.3 细菌学培养及病源菌观察 将送检及扑杀具有神经症状的病羊,无菌取脑、肝或脾组织用肉汤研磨成1∶5乳剂,接种于亚碲酸钾血液琼脂培养基,37℃培养24 h,挑取菌落、涂片、革兰氏染色、镜检,观察菌体形态及染色特征。?
2 结果 ?
2.1 发病年龄、发病季节、饲养管理 发病年龄多为2~4月龄及断奶前后1个月的羔羊,多发生于每年4~5月或10~11月份,饲养方式以分群圈养为主,密度大,运动不足,主以麦草粉、青微贮配合精料喂养,但在春、秋两季,青贮饲料比例较高,青贮窖为简易土坑,鼠洞较多,饲养管理水平较粗放。
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2.2 临床症状 病初表现精神沉郁,呆立,低头垂耳,行动缓慢,不愿活动,食欲不佳,采食无神,咀嚼吞咽迟缓,体温升高至40.5~41.7℃,呼吸稍困难,有时从鼻孔流有黏液状分泌物,而后体温稍下降,有的病羊行走时头向前下方伸张,一遇障碍物,则以头抵靠不动,有的头颈偏于一侧,走动时一侧转弯,严重者颈项强硬,头颈向上弯,呈角弓反张,甚至卧地不起,四肢游动,神志昏迷,直到死亡。?
2.3 病原菌的形态及培养特性 将病羊脑、肝组织乳剂接种于亚碲酸钾血液琼脂培养基经37℃ 24 h培养后,在平板上见有圆形、隆起、湿润、黑色的菌落,涂片染色、镜检,可见有多量两端钝圆、稍弯曲的革兰氏阳性小杆菌,菌体散在,有的成对构成“V”字形,有的排列成栅栏状,无芽孢或荚膜。?
2.4 病理剖检 将自然死亡及扑杀病羊剖检可观察到脑膜水肿,血管高度扩张充血呈树枝状,脑脊液较正常为多,稍浑浊,有时呈淡红色;大、小脑脑沟变浅,脑回稍宽,切面湿润、水肿,脑实质可见有散在的米粒大小灰白色病灶并有针尖大小鲜红色的出血点。肝脏被膜稍紧张,色泽淡黄,切面可见有不规则的小米粒大小灰白色病灶。心脏心包内积液较多、浑浊,有的病羊在心外膜上可见有多量灰黄色絮状的纤维蛋白附着,易剥离,冠状沟有针尖大小的出血点,心耳、心室肌有散在的灰白色针尖大小的病灶。肺脏在心叶、尖叶、膈叶均有散在的灰红色、灰白色点状病变,切面挤压时,有淡红色炎性分泌物流出。肾脏被膜易剥离,切面有数量不一、大小不等的出血点。淋巴结肿大,被膜紧张,切面稍隆起,较湿润,并有大小不等数量不多的灰黄色或灰白色病灶。?
2.5 病理组织学观察 脑:脑软膜下毛细血管高度扩张、充血,脑软膜水肿,有多量丝状网絮状淡红色纤维蛋白渗出并网络有数量不等的单核巨噬细胞,嗜中性粒细胞,使脑软膜增厚;脑实质水肿,有散在的局灶性小化脓坏死灶,坏死灶中神经细胞消失,主要被嗜中性粒细胞、单核巨噬细胞取代,形成结节状;部分病例脑组织毛细血管高度扩张,内充盈大量红细胞,在血管周围形成几层由嗜中性粒细胞、单核巨噬细胞为主的“血管套”现象;有的在脑实质区及血管外周有多量红细胞,出血较明显。?肝脏:肝组织表现不同程度的变性、坏死,多数肝细胞胞浆内充有多量针尖大小均质红染的蛋白颗粒,致使肝细胞浑浊、肿胀;有的肝细胞核溶解、消失,呈局灶性坏死,并可见有数量不等的嗜中性粒细胞、单核巨噬细胞浸润;有的在汇管区的小叶间动脉、小叶间静脉、小叶间胆管周围也有多量单核细胞、嗜中性粒细胞浸润;有的肝细胞发生坏死后,被多量单核细胞、嗜中性粒细胞取代形成单核细胞性肉芽肿。
肺脏:支气管管腔中有多量炎性渗出物,并有较多的嗜中性粒细胞、单核细胞及脱落的黏膜上皮细胞交织在一起,有的支气管黏膜上皮细胞增生、化生较为明显;支气管周围的血管扩张、充血,周围的肺泡腔中有多量浆液及嗜中性粒细胞、单核细胞,肺泡壁毛细血管扩张、充血;有的肺组织表现局部坏死灶,坏死灶中肺组织结构消失,由嗜中性粒细胞、单核细胞、成纤维细胞所取代。?
淋巴结:被膜下的淋巴窦扩张,周围含有多量浆液及少量纤维素渗出物,并混有数量不等的单核细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞;淋巴结的皮质、髓质区界限不清,皮质区淋巴小结的结构较混乱,生发中心消失,有的呈块状淡红色的坏死区,有的由多量单核细胞、嗜中性粒细胞、网状细胞所占据;髓质区充血、水肿,并有多量单核细胞、嗜中性粒细胞浸润,网状细胞?增生?。?
心脏: 心外膜间皮细胞肿胀、脱落, 有多量浆液、纤维蛋白渗出,其中交织有多量单核细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞, 心外膜下毛细血管扩张充血、出血;心肌细胞发生不同程度的变性坏死, 部分肌纤维断裂, 肌细胞核溶解、消失,被炎性细胞及增殖的纤维细胞所取代, 心肌间毛细血管充血, 并有轻微出血。?
肾脏:肾小球体积增大,毛细血管外膜细胞显著增多,表现富核现象,肾小球囊狭小,部分肾球囊内有丝状的纤维蛋白;肾小管上皮细胞肿大,胞浆内有多量淡红色微细的蛋白颗粒,有的上皮细胞膜破裂,大量蛋白颗粒流失于管腔中,使之狭窄,不规则呈现星芒状;有的肾小管上皮细胞核溶解、消失;间质血管扩张、充血,并有数量不等的单核细胞、嗜中性粒细胞浸润;髓质区毛细血管扩张、充血,有多量嗜中性粒细胞、单核细胞浸润,有的还可见有数量不等的红细胞,表现出血。?
3 分析与讨论
3.1 通过对患羊的临床症状、大体剖检、细菌学培养、病原的鉴定及病理组织学的观察结果可以表明,引起新疆部分垦区绵羊发病的病原菌为单核细胞增多型李氏杆菌所致。?
3.2 从我们对发病地区的流行病学调查可以看出,此病多发生于春、秋两季,在这期间,给圈养舍饲的羔羊喂了多量青微贮饲料,再加之青贮窖设备很差;周围鼠洞又多,饲养管理粗放等因素是造成该病发生的重要原因,据资料报道,单核细胞增多型李氏杆菌广泛存在于自然界,污染的饲料和水可能是传染的主要媒介,而这些发病地区,很可能是由于饲喂了由李氏杆菌污染的青微贮饲料为此病的发生创造了有利的条件。?
3.3 该病临床以发热、神经症状表现为特点,此症状应注意与羊脑包虫病、伪狂犬病、牛散发性脑脊髓炎相区别,若要确诊本病,最好依靠病理组织学观察和病原菌学检查可加以鉴别。?
3.4 单核细胞增多型李氏杆菌是一种危害较大的人畜共患病原菌,由于它广泛存在于自然界,受该菌污染的食品,健康人食入后造成食物中毒甚至死亡时有报道,为确保人们的身体健康,建议发病地区对病死羊的肉、皮、脏器应予以高度重视,妥善处理。