1.温度：双孢蘑菇是喜欢冷凉气候的菌类，但在不同生育阶段，对温度的要求是不同的。菌丝体生长的温度范围较广，为4--32℃。最适温度为 22--25℃，在这样的温度下，菌丝生长粗壮浓密，生活力强。当温度低于5℃时，菌丝生长极为缓慢。温度高于30℃，菌丝体生长稀疏无力，生活力降低，菌丝变黄，易老化，33℃以上菌丝体停止生长。
子实体发育的温度范围为5--22℃，最适温度13--16℃，在此温度条件下长出的蘑菇，菌盖肉厚致密，菇体较重，柄短，产量高，质量好。超过18℃，子实体生长虽然加快，但菌柄细长，肉质疏松，且易产生薄皮开伞菇，质量差。当室温持续几天在22℃以上时，会引起大面积菌蕾枯萎死亡。蘑菇在12℃以下时，子实体生长速度减慢，出菇减少，产量降低。当室温低于5℃时，子实体停止生长。
双孢菇成熟后，孢子散落的最佳温度是18～20℃，温度超过27℃或低于14℃，子实体不散落孢子。孢子萌发的适温为23--25℃，环境条件适宜，孢子7--12天萌发。
2.水分：蘑菇菌丝体和子实体都含有90%左右的水分。蘑菇在整个生长发育时期所需的水分主要来自于培养料、覆土层和空气湿度。但不同的生长发育时期，蘑菇对水分的要求是不同的。
双孢蘑菇菌丝体生长阶段，培养料中的含水量应保持在60%左右，低于50%时，菌丝体生长不良，表现出菌丝生长缓慢，绒毛状菌丝多而细，难以形成子实体。若培养料的含水量高于70%，会使料内透气性差。菌丝生活力降低，培养料中部难以长透菌丝。料表面菌丝表现出稀疏无力，甚至萎缩。
子实体形成和长大要求较高的湿度。一般以培养料表层的含水量为60%--65%，覆土层的含水量为18%--20%，空气相对湿度90%左右为最适宜。若培养料表层湿度过低，不易形成子实体，覆土层过干，蘑菇瘦小，产量低；过湿，特别是在出菇水分管理中，一次喷水过多，水分渗透至培养料内，会使菌丝萎缩。空气相对湿度在出菇前保持80%左右，过高易感染杂菌。出菇期间应经常保持湿度在80%--90%，过低会使覆土层很快干燥，子实体生长缓慢，菌盖上易产生鳞片，菇柄空心。空气湿度超过95%时，易发生各种杂菌和病害。
3.空气：双孢菇是一种好气性菌类。菌丝体和子实体在生长中大量吸进氧气，排出二氧化碳。另外，培养料中还有其他微生物，在继续分解养分的过程中，也会不断地产生二氧化碳。因此，很容易使菇房的二氧化碳浓度上升，当超过一定浓度时，就会阻碍菌丝体生长和子实体的发育。一般在菌丝生长时期，菇房内的二氧化碳浓度应控制在0.5%以下。
在发生子实体时期，要时常开窗能通风换气，二氧化碳浓度不高于0.05%~0.1%，当超过一定浓度时贵州省会阻碍菌丝体生长和子实体的发育。常发生蘑菇子实体柄细长、畸形菇增多、开伞早等现象。由于蘑菇培养料在被菌丝分解时还会产生硫化氢、氨等有害气体，对蘑菇的生育有影响，而且封闭的环境还易引起各种杂菌和病害的发生，因此菇房或出菇场地要有良好的通风设施。特别是出菇以后，子实体耗氧量大，应经常通风换气，排除有害气体，补充新鲜空气。
4.酸碱度：双孢蘑菇生长的pH值范围较广，在pH值3.5--8.5均能良好地生长。而菌丝生长pH值以6.5--7为最适宜，由于菌丝在生长过程中不断地产生草酸、碳酸等有机酸类，会使培养料逐渐酸化。因此，培养料进房时的pH值应为7--7.5，这样菌丝才能正常生长。同时，较高的pH值还能显著地抑制霉菌的生长。目前，一些国家在堆培养料时，前发酵pH值8.3--8.5，后发酵或进房前pH值7--7.5。据试验，灭菌后培养料的pH值为7时，双孢菇菌蕾形成最多。覆土的土粒pH值为7--8，同样可以防止霉菌侵染。
5.光线：双孢蕾菇不论是菌丝体或子实体生长都不要光线。在完全黑暗的环境中，长出的蘑菇，颜色洁白，柄短粗壮，形态圆整，品质好。阳光直射会造成子实体菌盖薄、柄细长、易开伞、菇体表面发黄干燥、质量差。因此，双孢菇应该进行遮光栽培。
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