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本项目针对沈阳某乳业公司7个奶牛场的3 000多头成母牛进行血液生化指标抽查，目的在于了解该公司牛群血中钙、磷和β-胡萝卜素的盈缺状况，以及与酮病相关的营养代谢病的发病情况、发病规律，为早期预防、治疗酮病和合理饲养管理提供科学依据。
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1 材料与方法
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1.1 实验时间及血样来源 本次实验于2003年2月21日至4月22日期间分３个阶段进行。第１阶段测定84头奶牛；第２阶段测定84头奶牛；第３阶段测定85头奶牛，共253头奶牛。采样牛分别来自该公司的７个奶牛场。将每个奶牛场的成年牛分为高产牛、产后牛和干奶牛３种类型，其中高产牛为日产奶量在25 kg以上的牛，产后牛为产后15天以内的牛。每次采样都是从3种类型牛中随机抽取采样牛，并记录采样牛的具体情况和资料。采样工作于早晨7点开始，颈静脉采血10ml，肝素钠抗凝，3 000r/min离心10min，血浆分装于小塑料管中封口后置冰盒内送实验室待测。未测完的血样，置冰箱4℃保存。
1.2 检测内容 血浆中钙的测定（甲基麝香草酚蓝比色法）；血浆中无机磷的测定（硫酸亚铁磷钼蓝比色法）；血浆中β-胡萝卜素的测定（比色法）；血浆中酮体的检测（快速检测法）；血糖的检测（邻甲苯胺法），血糖含量从第二阶段开始测定；血浆中谷?丙转氨酶（GPT）的检测（赖氏2,4-二硝基苯肼法）；血浆中CO2结合力的检测（酸碱滴定法）。
1.3 正常参考值
健康成年奶牛(产奶期)血中正常参考值为：钙2.25~2.75 mmol/L；磷1.39~2.77mmol/L；β-胡萝卜素540~1 340μg/100ml，平均值770μg/100ml；血中酮体含量在10mg/dl以下；血糖62～68.04 mg/dl，平均值65.02 mg/dl；CO2结合力28～34 mmol/L，平均值31 mmol/L；GPT 5～27卡门单位。?
2 结果与分析?
2.1 受试牛血中钙、磷的检测结果 见表1和表2。(略)?
全群牛血中钙、磷含量都较正常值偏低，特别是磷的含量更低。血钙的最高值和最低值分别为3.32 mmol/L和1.53 mmol/L，平均值为2.28±0.46 mmol/L；血磷的最高值和最低值分别为2.71 mmol/L和0.84 mmol/L，平均值为1.72±0.42mmol/L。血中钙、磷［血钙（mg/dl）∶血磷（mg/dl）］比例不当，超过正常水平要求的1.5∶1.0以上，平均为1.73∶1.0，最大值为3.96∶1.0，最小值为0.645∶1.0（即磷的含量比钙高，有的血磷含量是血钙含量的两倍）。血中钙、磷含量乘积［血钙（mg/dl）×血磷（mg/dl）］偏低，平均值为46.95，最高值为63.74，最低值为24.50。高产奶牛血中钙、磷水平相对其他类型牛较高，但血钙仍较正常值偏低。产后牛血中钙、磷是所测类型牛中最低的，尤以浑河牛场最明显，血钙平均值为1.78mmol/L, 血磷平均值为1.72mmol/L。产后牛中有53%的牛有病，以食欲不佳和胎衣不下者居多。奶牛血中钙、磷含量均较低，与日粮中钙磷含量不足、日粮中钙磷比例不合理、瘤网胃代谢功能紊乱、奶牛自身机体机能状态不佳等均有关。
2.2 受试牛血中β-胡萝卜素的检测结果 见表1和表2。
血中β-胡萝卜素含量在各奶牛场之间差异较大，最高值为657μg/dl, 最低值为52μg/dl，平均值为292.11±175.34μg/dl，与正常值相比差异较大，低于微量（低于100μg/dl即属微量）的有13头次。高产牛血中β-胡萝卜素含量相对较高，明显高于其他类型的牛，平均值为378.46±145μg/dl，其中含量相对较高的是三洼奶牛场，其高产奶牛血中β-胡萝卜素含量平均为473.38μg/dl，而最高值657μg/dl 就是由三洼奶牛场的5849号牛创造。同样该公司所属奶牛场中产奶量最高的也是三洼奶牛场，这也说明血中β-胡萝卜素含量高低与产奶量呈正相关。产后牛血中β-胡萝卜素含量是所测类型牛中最低的，尤以浑河牛场最明显，其产后牛血中β-胡萝卜素的平均值为131.50μg /dl。本次检测结果说明该公司牛群日粮中青绿多汁饲料不足。
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2.3 奶牛血中酮体的检测结果 见表3。?
共有45头被检出血中酮体阳性，总阳性率为17.78%（45/253），其中第1阶段测定时的阳性率为最高，第2阶段次之，第3阶段为最低。不同阶段发病率的降低可能与饲料和饲养管理的逐步改善有关。在45头酮体阳性牛中，酮体含量为10~20 mg/dl的占40.00%（18/45）；含量为20～30mg/dl的占42.22%（19/45）；含量为30～40mg/dl的占11.11%（5/45）；含量为40～50mg/dl的占6.67%（3/45）。在各类型牛中，阳性率最低的是干奶牛，而产后牛的发病率最高，为39.13%(36/92)，这符合酮病多发于奶牛产后第一个泌乳月的规律。此外，在45头酮体阳性牛中，初产牛的阳性率为40.00% (18/45)，二产牛的阳性率为33.33%（15/45）, 三产牛为15.56%(7/45),四产牛为6.67% (3/45),五产牛为4.44%(2/45), 五胎以上的为2.22%(1/45)。本次测定以初产牛的阳性率为最高，这与其他报道有一定的差异，但类似现象在生产中并不少见，具体原因有待继续探讨，可能与该公司育成牛的饲养不当有关。
所有奶牛场都有酮病发生，有的牛场阳性率还较高，每个牛场都以产后牛阳性率较高，其次是高产牛。这说明该公司的牛群在围产期阶段饲养管理方面存在的问题较大。
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2.4 血糖的检测结果 从表1和表2可见，本次测定所得数值较健康奶牛的正常值均偏低，说明奶牛整体的营养状况不太好。其中干奶牛测定值最高，而产后牛数值最低。高产牛因产乳量大，糖的消耗量也大，所以血糖含量较低。产后牛血糖含量普遍偏低，这与所有牛场都存在产后牛酮体阳性率较高相适应，并且每个奶牛场都有个别牛产后出现血糖含量极低的现象。奶牛产后血糖浓度降低可见于产后分娩应激性厌食、瘤网胃消化功能紊乱、脂肪肝和酮病等。
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2.5 血中CO2结合力的检测结果 见表1和表2。产后牛都存在酸中毒的可能，高产牛也一样。第１阶段时，共有25头奶牛的测定值低于正常值，占29.26%；第２阶段共60头奶牛的测定值低于正常值，占71.43%；第３阶段更低，测定值低于正常值的有75头，占88.23%。说明代谢性酸中毒问题严重，发病率高。三个阶段发病率的逐渐增加可能与天气变热有关。
在各类型奶牛中，以高产牛问题最严重，平均测定值最低，低值奶牛占高产牛总数的82.8%，说明高产牛采食精料量较大，导致瘤胃内酸度增加，所以更易发生代谢性酸中毒。
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2.6 血中GPT的检测结果 见表1和表2。除第２阶段测定结果的平均值低于正常值外，第３阶段略偏高，第一阶段较高，总平均值也高于正常值。在不同类型的奶牛中，以高产牛血中GPT的平均含量最高，其中GPT高于正常的牛占高产牛总数的72.86%?；而干奶牛的平均含量相对较低，但GPT高于正常的占47.89%。
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所测奶牛血中GPT普遍较高，说明该公司牛群除了酮病或脂肪肝的发病率较高外，还存在某些原因引起肝脏慢性中毒的可能，导致整个牛群的肝功能普遍较差。奶牛血中GPT超标的原因很多，而且各牛场情况可能有所不同，不能轻易下结论，还需进一步探讨。可能的原因有如下几种：产前饲养失宜，干奶期过肥等原因导致的产后脂肪肝或酮病；由于精料量过多、酒糟喂量大或酸败等原因引起的瘤胃酸中毒而导致的肝脓肿；预混料中某些微量元素或维生素超标而导致的肝脏慢性中毒；饲料中某些原料（如棉籽饼等）被霉菌污染而导致的肝脏慢性中毒；环境中某些常量或微量元素超标（如水或牧草中高氟或高硒等）引起的肝脏慢性中毒等。
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３ 小结
全群牛血中钙、磷含量的平均值偏低，其中产后奶牛血中钙、磷水平更低；血中钙、磷比例不当；血中钙、磷含量乘积偏低，牛体内钙、磷总量不足。全群牛血中β?胡萝卜素含量严重不足，但高产奶牛血中含量相对较高。全群牛中产后牛的酮体阳性率最高，并且初产牛和二产牛阳性率较高。全群牛血糖含量的平均值为58.56±21.35mg/dl，其中干奶牛测定值较高，高产牛血糖含量较低，产后牛最低。?
全群牛血中CO2结合力的平均值为26.83±6.31 mmol/L，高产牛血中CO2结合力较低。
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全群牛血中GPT含量的平均值为29.27±16.14卡门单位，其中高产牛血中GPT的平均含量最高，而干奶牛的平均含量相对较低。?
该公司牛群在围产期阶段存在较大的饲养和管理问题。
